生理学报Acta Physiologica Sinica, April 25, 2003, 55(2): 153-159
Received 2002-07-01
Accepted 2002-12-03
This work was supported by the grants from 863 Program (#2002AA205051 and #2001AA216151) of Ministry of Science and Technology of China, from 973 Program (#2001CB509906) of Ministry of Science and Technology of China, and from Beijing Innovation Project (#A020220010190).
*Corresponding author. Tel: +86-10-66932203; Fax: +86-10-68167357; Email: peixt@nic.bmi.ac.cn
研究论文
人骨髓间充质干细胞在成年大鼠脑内的迁移及分化
侯玲玲1, 郑敏1, 王冬梅1, 袁红丰1, 李海民1, 陈琳1, 白慈贤1, 张涌2,裴雪涛1,*
1军事医学科学院输血研究所、 军事医学科学院干细胞中心, 北京 100850;
2 西北农林科技大学胚胎工程实验室,陕西省杨凌 712100
摘要: 骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)是目前备受关注的一类具有多向分化潜能的组织干细胞, 体外可以分化为骨、 软骨、 脂肪等多种细胞。因此, MSCs是细胞治疗和基因治疗的种子细胞之一。为了探索MSCs的迁移和分化趋势, 为帕金森病(Parkinson disease, PD)的干细胞治疗提供理论和实验依据, 本实验将体外扩增并转染增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein, EGFP)的人骨髓MSCs注入PD大鼠脑内纹状体, 观察了人骨髓MSCs在大鼠脑内的存活、 迁移、 分化以及注射MSCs前后大鼠的行为变化。结果表明, 人骨髓MSCs在大鼠脑内可存活较长时间(10周以上); 随着时间的延长, MSCs迁移范围扩大, 分布于纹状体、 胼胝体、 皮质以及脑内血管壁; 免疫组化法检测证实MSCs在大鼠脑内表达人神经丝蛋白(neurofilament, NF)、 神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase, NSE)以及胶质原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acid protein, GFAP); PD大鼠的异常行为有所缓解, 转圈数由8.86±2.09 r/min下降到4.87±2.06 r/min, 统计学分析P<0.05为差异显著。以上观察结果表明, 骨髓MSCs有望成为治疗PD的种子细胞。
关键词: 骨髓间充质干细胞; 大鼠; 脑; 分化; 迁移
中图分类号: Q254
Migration and
differentiation of human bone marrow mesenchymal stem cells in the rat brain
HOU Ling-Ling1, ZHENG Min1, WANG Dong-Mei1, YUAN Hong-Feng1, LI Hai-Min1, CHEN Lin1,
BAI Ci-Xian1, ZHANG Yong2, PEI Xue-Tao1，*
1Beijing Institute of Transfusion Medicine, Beijing 100850;
2Northwest Sci-Tech University of Agriculture and Forestry, Yangling, Shanxi 712100
Abstract: Bone marrow mesenchymal stem cells (MSCs) are multipotent tissue stem cells that can be induced in vitro to differentiate into a variety of cells such as osteoblasts, chondrocytes and adipocytes. MSCs are useful vehicles for both cell and gene therapy for a variety of diseases. Here, we injected human MSCs with enhanced green fluorescent protein (EGFP) into the striatum of Parkinson disease (PD) rat and examined their survival, migration, differentiation, and the behavior changes in PD rats, which will provide a theoretical foundation and technical method for clinic PD therapy by stem cells. The results showed that human bone marrow MSCs can survive in rat brain for a long time (exceeding 70 d). MSCs were found in multiple areas of the rat brain including the striatum, the corpus callosum, contralateral cortex and even the brain vascular wall. Immunocytochemical staining suggested that implanted cells expressed human neurofilament (NF), neuron-specific enolase (NSE) and glial fibrillary acid protein (GFAP). At the same time, remission in abnormal behavior of the PD rats appeared. Rotation scores decreased gradually from 8.86±2.09 r/min pre-transplantation to 4.87±2.06 r/min 90 d post-transplantation (statistic result showed P<0.05).
Key words: mesenchymal stem cells; rat; brain; migration; differentiation
在干细胞工程兴起以前, 人们在脑内移植方面作了许多探索工作。曾经有人用大脑皮质、 中脑组织、 海马、 下丘脑、 肾上腺髓质以及小脑皮质等作为移植物治疗帕金森病(Parkinson disease, PD)、 脑萎缩、 癫痫、 脊髓损伤、 小脑萎缩等神经系统疾病, 虽然皆获得一定的近期疗效, 但也存在许多问题, 如存在排异反应, 存活、 生长的难题尚难克服, 胚胎脑组织来源困难, 以及伦理学的问题等。之后, 又有人尝试用成纤维细胞、 胎儿星形胶质细胞以及支持细胞移植来治疗PD, 结果发现仅有星形胶质细胞能够整合于宿主脑内, 并发生迁移[1]。随着干细胞工程的推进, 细胞替代治疗已成为治疗损伤、 遗传缺陷性或退行性疾病的新途径。作为神经系统疾病细胞治疗的供体细胞应容易获得, 能够迅速扩增, 能够在宿主脑内长期存活, 易于外源基因的转染和长期表达[2, 3]。其中骨髓细胞是可能的来源之一。有实验表明[4], 骨髓单个核细胞能够穿过血脑屏障, 而且有助于小胶质细胞的正常转化。骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)是目前备受关注的一类来源于骨髓单个核细胞群, 具有多向分化潜能的组织干细胞。MSCs特性稳定, 连续传代培养和冷冻保存后仍具有多向分化潜能。在体外特定的诱导条件下, MSCs可以分化为骨、 软骨、 脂肪、 肌腱、 韧带等多种细胞[5-7]。动物体内实验也发现骨髓细胞来源的神经细胞[1, 8]、 肝脏卵圆细胞[9]、 肌肉细胞[10]等, 这可能也与MSCs有关。我们在体外成功定向诱导骨髓MSCs向神经细胞分化的基础上, 进一步探讨了骨髓MSCs在动物脑内的命运, 将体外扩增并转染增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein, EGFP)的骨髓MSCs注入PD大鼠脑内纹状体, 研究了MSCs在动物脑内的存活、 迁移、 分化以及注射MSCs前后大鼠的行为变化。
1 材料和方法
1.1 动物模型的建立
1.1.1 6-OHDA的微量注射
取正常雄性Wistar大鼠 (250-300 g, 军事医学科学院动物中心提供)20只, 术前经测试确认其无异常行为后进行实验。以1%的戊巴比妥钠溶液 (40 mg/kg) 腹腔注射麻醉大鼠, 将其固定于立体定位仪, 然后参照Paxinos和Watson[11]的大鼠脑立体定位图谱, 确定右侧黑质定位坐标为: 前囟后4.4 mm, 矢状缝右侧1.3 mm, 颅骨下8.5 mm。按此坐标开颅并用微量注射器注射6-OHDA 8 μg (溶于4 μl含质量分数为0.2%抗坏血酸的生理盐水中, Sigma), 注射速度1 μl/min, 注毕留针15 min, 并以1 mm/min的速度缓慢退针。对照组按上述同样方法和坐标, 仅注射含质量分数为0.2%抗坏血酸的生理盐水4 μl。
1.1.2 行为检测
术后4周进行行为测试。将受试动物腹腔注射阿朴吗啡(APO)(0.5 mg/kg), 5-10 min后开始观察并记录大鼠的行为变化, 连续观察记录30 min。取有PD症状的大鼠进行细胞注射实验。
1.2 MSCs定点注入有PD症状的大鼠脑内
1.2.1 MSCs的体外分离、 纯化和扩增培养
骨髓MSCs的分离、 纯化和扩增参照Jaiswal等的方法[12]。无菌条件下采集正常人的骨髓, 离心去脂肪层, 用含15%胎牛血清(Hyclone)的α-MEM培养液适当稀释, 制成细胞悬液, 用比重1.073 g/ml的Percoll分离液分离(400 g, 20 min), 取界面层, 离心洗涤后以2.0×105/cm2 (T-25培养瓶)的密度接种于MesencultTM培养液(Stem Cell Co.)中, 置于37℃、 含5% CO2饱和湿度的孵箱内培养。72 h后更换培养基, 弃掉未贴壁细胞。以后每3 d换液1次。细胞长到80%汇合时用1∶1的0.1%的胰蛋白酶和0.01% EDTA 混合液消化传代, 以8.0×103/cm2的密度接种于传代培养瓶(T-25)中进行扩增培养。
1.2.2 流式细胞仪检测
取扩增后的MSCs, 用胰蛋白酶消化, 用含2% BSA的PBS洗涤后制成浓度为1.0×106/ml的单细胞悬液, 每个Eppendof管加500 μl细胞悬液, 阴性对照管加入5 μl IgG1-FITC和5 μl IgG1-PE单克隆抗体(BD PharMingen); 1号管加入5 μl CD11a-FITC和5 μl CD29-PE单克隆抗体(BD PharMingen); 2号管加入5 μl CD71-FITC和5 μl CD34-PE单克隆抗体(BD PharMingen)。室温孵育20 min, 用流式细胞仪检测。
1.2.3 带有增强型绿色荧光蛋白的包装细胞株的构建
用EGFP基因为标记基因, 以逆转录病毒pLXSN/EGFP (由美国Miller AD博士馈赠)为载体, 用脂质体介导转染包装细胞PA317, 经100-250 nmol/L的氨甲蝶呤(MTX)筛选出抗性克隆, 用NIT3T3细胞、 经MTX抗性检测病毒滴度达到5.5×105 cfu/ml。
1.2.4 逆转录病毒转染MSCs
收集新鲜高滴度包装细胞株PA317/pLXSN/EGFP上清, 用0.22 μm的滤膜过滤后加入终浓度为8 μg/ml的聚季铵盐(Polybrene, Sigma)为转染液。将转染液直接加入到扩增达70-80%汇合的MSCs培养板中, 6 h后加入等量的含10%胎牛血清的低糖DMEM, 37℃继续培养48 h, 一部分细胞用0.05%的胰蛋白酶消化后洗涤, 进行流式检测转染率; 其余的细胞用0.05%的胰蛋白酶消化后用无血清低糖DMEM培养基制成浓度为3.0×104-4.0×104 cells/μl的细胞悬液备用。
1.2.5 细胞注射
取有PD症状的大鼠, 以1%的戊巴比妥钠溶液腹腔注射(40 mg/kg)麻醉, 固定于立体定位仪上, 参照Paxinos和Watson[5]的《大鼠脑立体定位图谱》, 确定右侧纹状体(尾状核)坐标为(采用四种坐标定位): 前囟前1.0 mm, 矢状缝右侧2.5 mm, 颅骨下4.0-6.0 mm; 前囟前0.48 mm, 矢状缝右侧3.0 mm, 颅骨下4.5-6.5 mm; 前囟位, 矢状缝右侧3.0 mm, 颅骨下4.0-5.0 mm; 前囟后0.4 mm, 矢状缝右侧3.4 mm, 颅骨下4.6-5.8 mm。每只鼠注射两点, 每点5 μl细胞悬液(1.5×105-2.0×105 cells), 注射速度1 μl/min, 注毕留针15 min, 并以1 mm/min速度缓慢退针。对照组按上述同样方法和坐标, 注入同样体积的生理盐水。
1.2.6 注射细胞后的检测
手术后10 d开始检测, 每隔10 d用APO腹腔注射检测PD症状, 同时每隔2周用含0.05%戊二醛的4%的多聚甲醛灌注取脑, 再用4%的多聚甲醛后固定6-8 h, 蔗糖梯度脱水后作冰冻切片, 观察荧光细胞的存活和迁移; 同时参照HistostainTM-SP(链酶卵白素-过氧化物酶)试剂盒(北京中山生物技术公司)的操作方法进行免疫组化实验, 检测人源性神经细胞抗原神经丝蛋白(neurofilament, NF)、 神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase, NSE)、 胶质原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acid protein, GFAP)以及多巴胺神经元的功能性递质多巴胺转运蛋白(dopamine transporter, DAT)。
2 结果
2.1 动物模型的检测
20只大鼠腹腔注射APO以后, 其中有8只表现出PD症状。成功造模的PD大鼠首先表现为木僵状态, 随后出现以健侧后肢为支点, 身体环曲, 首尾相接的快速旋转运动(平均转速>7 r/min); 部分大鼠出现明显的觅食、 弓背、 嗅探、 患侧后肢搔挠、 躁动、 易激惹等PD症状。对照鼠和不成功的大鼠模型未表现异常行为。模型建立的成功率为40%。
2.2 MSCs的纯化、 扩增
用比重1.073 g/ml的Percoll分离液分离, 经过贴壁筛选获得的骨髓MSCs 3 d时数量较少, 散在分布, 呈梭形。随着MSCs的迅速增殖, 11 d后出现较大的克隆, 20 d左右细胞生长达 80-90%汇合, 每个克隆约数百至数千个细胞, 此时的MSCs呈较均一的长梭形(图1)。每瓶单层汇合的MSCs用胰蛋白酶消化后平均获得(5.5±0.17)×105个MSCs, 将这些细胞再传代培养, 1周左右达汇合, 可继续传代扩增。扩增12代后获得2.3×109个细胞, 扩增约4.6×104倍。
图1. MSCs的形态
Fig. 1.Primary MSCs. Scale bar, 50 μm.
图2.MSC的抗原特性
Fig. 2.Antigen characteristics of MSCs. a: Control IgG-PE and IgG-FITC; b: CD29-PE and CD11a-FITC. Expanded MSCs express a high level of CD29 and don′t express CD11a; c: CD34-PE and CD71-FITC. Expanded MSCs express a low level of CD71 and don′t express CD34.
2.3 MSCs的表面抗原特性
用流式细胞仪检测MSCs的表面抗原, 结果见图2。CD34(造血干细胞的特异性表面标志)和CD11a(淋巴细胞表面标志); 强表达CD29(整合素家族的成员), CD71(转铁蛋白受体)仅有微弱表达。这表明MSCs是骨髓中区别于造血干细胞的一群处于未分化状态的非定向干/祖细胞。
2.4 人骨髓MSCs在大鼠脑内的存活、 迁移和分化
流式细胞仪检测结果表明, 高滴度包装细胞株PA317/pLXSN/EGFP的上清转染MSCs 48 h后的瞬时转染效率达到26%(转染的细胞表达绿色荧光蛋白), 见图3。将这些细胞注射入PD大鼠脑内, 2周后开始心脏灌注, 取脑作冰冻切片观察带有荧光的细胞。 结果发现MSCs在伤侧纹状体内已发生迁移, 散在分布, 多呈梭形, 见图4A, 4B。随后几周的检测表明, MSCs在PD大鼠脑内能存活至少10周以上。而且随着时间的延长, MSCs迁移的范围扩大, 大部分细胞在伤侧纹状体内散在分布, 部分细胞沿着伤侧胼胝体迁移, 少量细胞迁移到伤侧皮质区和健侧胼胝体及皮质区。同时发现, MSCs有的迁移到血管周围和血管内, 有的则存在于血管壁, 近似于血管内皮的形态和位置, 见图5A, 5B。
图3.高滴度包装细胞株PA317/pLXSN/EGFP的上清转染MSCs 48 h后的转染率为26%
Fig. 3.Transient transfection efficiency of high titer supernatant of packaging cell line PA317/pLXSN/EGFP after 48 h (26% of MSCs express EGFP).
图4.散在分布于大鼠脑内纹状体的人源性细胞
Fig. 4.Human MSCs with enhanced green fluorescent protein (EGFP) were injected into the striatum of Parkinson disease (PD) rats. These MSCs could survive and migrate in rat brain. A and B show human-derived cells localized diffusely in the injured striatum of rats. A: Fluorescent cells in the injured striatum (↑). B: Same position control in the light microscope. Scale bar, 25 μm.
免疫组化结果表明, 输注的MSCs在大鼠脑内微环境作用下2周后已开始向神经细胞转化, 在冰冻切片上可看到有NF、 NSE、 GFAP的表达(图6A-C);
未输注细胞的大鼠脑冰冻切片上却没有人源性神经细胞抗原的表达。同时发现, 输注MSCs后PD症状缓解的大鼠脑冰冻切片DAT染色呈阴性。
细胞输注后对大鼠行为检测发现, 随着时间的延长转圈次数逐渐降低, 90 d后由输注细胞前的8.86±2.09 r/min降为4.87 ±2.06 r/min, 统计学分析P<0.05, 差异显著, 见图7; 输注生理盐水的对照组则随着时间的延长转圈数无明显减少, 90 d后平均转圈数为9.16±1.95 r/min。这说明输注细胞后PD症状有缓解趋势。
图5.分布于大鼠脑内血管壁的人源性细胞
Fig. 5.Human MSCs with enhanced green fluorescent protein (EGFP) were injected into the striatum of Parkinson disease (PD) rats. These MSCs could survive and migrate in rat brain. Parts of them were localized in the blood vessel wall of rat brain. A: Fluorescent cells in the blood vessel wall (↑). B: Same position control in the light microscope. Scale bar, 25 μm.
图6.大鼠脑纹状体内存在的表达人源性神经细胞抗原的细胞
Fig. 6.Transplanted MSCs could differentiate into neurocytes in PD rat brain. A, B and C show the cells expressing human NF, NSE and GFAP in rat striatum. Scale bar, 50 μm.
表1. PD大鼠脑内注射人骨髓MSC前后的转圈数
Table 1. Rotation score detection of PD rat pre- transplantation and Post-transplantation (r/min,mean±SE)
|
Pre-transplantation |
Post-transplantation |
||||||||
|
10d |
20d |
30d |
40d |
50d |
60d |
70d |
80d |
90d |
|
|
8.86±2.09 |
7.66±1.87 |
6.80±2.86 |
7.08±2.84 |
6.53±2.28 |
6.64±2.53 |
6.00±2.40 |
5.83±2.16 |
5.42±2.10 |
4.87±2.06 |
图7.PD大鼠脑内注射人骨髓MSC前后的转圈数检测
Fig.7. Rotation scores detection of PD rat pre-transplantation and post-transplantation. The results showed that the rotation scores decreased significantly (P<0.05).
3 讨论
PD是老年人常见的以肌强直、
运动徐缓、 震颤等为特征的进行性神经系统疾病。为了进一步探索脑的结构与功能, 寻找征服疾病的有效手段, 人们制作PD动物模型来深入研究。本实验参照国内外的方法制作PD大鼠动物模型,
采用神经毒素6-OHDA损毁大鼠一侧脑黑质致密部, 使损毁侧脑组织液中多巴胺(dopamine, DA)代谢产物含量明显降低, 造成黑质致密部和腹侧背盖区酪氨酸羟化酶(tyrosine
hydroxylase, TH)阳性的DA能神经细胞被破坏, 使大鼠出现以阿朴吗啡诱发的嗅探、 患侧后肢搔挠、 躁动、 激惹以及向健侧快速旋转等为特征的异常行为。然后,
将人MSCs注入大鼠脑内纹状体部分观察其迁移、 存活以及对PD症状的影响。我们损毁一侧脑黑质致密部而将细胞注入同侧纹状体的原因是, 脑黑质致密部和腹侧背盖区的酪氨酸羟化酶阳性的DA能神经细胞分泌的神经递质多巴胺作用于纹状体的靶位点。
在干细胞工程兴起以前, 人们在脑内移植方面作了许多探索工作。曾经用脑组织作为移植物治疗PD、 脑萎缩等神经系统疾病。虽然皆获得一定的近期疗效, 但也存在许多问题。随着干细胞工程的兴起,
干细胞治疗将成为新的治疗途径而被临床采纳。由于骨髓MSCs具有多向分化潜能, 而且特性稳定, 体外扩增迅速, 取材方便, 目前已成为研究的热点之一。为进一步探索MSCs在脑内的命运,
为PD的干细胞治疗提供理论和实验依据, 我们在体外成功定向诱导骨髓MSCs向神经细胞分化的基础上[13], 又将体外扩增的人骨髓MSCs注入PD大鼠脑内纹状体,
研究其在体内的迁移和分化情况。结果显示, 人骨髓MSCs注入大鼠脑内后能够较长时间存活(至少10周以上), 并发生广泛迁移, 同时表达人源性神经细胞抗原NF、
NSE以及GFAP, 这表明MSCs在大鼠脑内微环境的作用下可能模仿神经干/祖细胞的行为, 沿着一定的路线迁移, 而且有向功能神经细胞分化的潜能。但未检测到多巴胺神经元功能递质DAT的分泌。初步认为,
植入的人MSC虽然能向神经细胞分化, 但分化较缓慢, 植入的细胞很长一段时间呈梭形, 说明这种外源性的神经细胞不能与宿主神经细胞整合, 宿主症状的缓解可能是由于植入的MSCs分泌一种可以上调脑细胞可塑性的蛋白质所致。另有实验将MSCs注入脑局部缺血大鼠模型的脑皮质部位,
几周后大鼠症状发生缓解, 植入的细胞表达神经细胞表面标志, 但不能与宿主神经细胞整合, 他们认为大鼠症状的缓减与植入的MSCs分泌的Ⅰ型胶原和纤粘连蛋白有关, 因为他们发现移植的MSCs在6周后仍然保持其分泌Ⅰ型胶原和纤粘连蛋白的特性[14]。神经干细胞的迁移和分化在脑发育的早期比较迅速,
随着年龄的增长, 迁移和分化速度变得很慢[15]。有实验证明[16], 星形胶质细胞在脑内的迁移路线与神经干细胞相似。Kopen等[17]将5-溴-2-脱氧尿苷(BrdUrd)标记的小鼠骨髓基质细胞注入新生小鼠的侧脑室,
12 d后发现输注的骨髓基质细胞能够迁移到前脑和小脑的整个部位, 在纹状体和海马的部分骨髓基质细胞表达分化为星形胶质细胞, 表达GFAP。本实验和Kopen等的实验均植入骨髓来源的细胞,
但在宿主脑内表现出不同的细胞形态特征, 这可能与植入细胞的供体来源和宿主不同均有关。Eglitis和Mezey[8]把成年雄性小鼠的骨髓或反转录病毒载体标记的骨髓移植给亚致死量放射线照射的雌性小鼠,
3 d后便在受体雌鼠的脑内发现供体骨髓来源的神经细胞, 以后供体骨髓来源的神经细胞逐渐增多。原位杂交和免疫组化法检测发现, 供体骨髓来源的神经细胞表达小胶质细胞和星形胶质细胞的特异性标志。Bjrklund等[18]将从小鼠囊胚获得的野生型胚胎干细胞系D3(用M6小鼠特异性抗体或Hoechst标记)注入PD大鼠模型的脑内纹状体,
14-16周后心脏灌注取脑做冰冻切片, 用免疫荧光技术和激光共聚焦显微镜检测发现植入的细胞分化形成神经元表型, 表达神经元功能性递质和特异性标志如酪氨酸羟化酶(tyrosine
hydroxylase, TH)、 NeuN (Neuronal nuclei)、 DAT、 芳香氨酸脱羧酶(aromatic amino acid
decarboxylase, AADC), 但存在一个不容忽视的问题是出现了一定的致瘤性(20%)。相比较而言, MSCs却没有致瘤性的相关报道。本实验输注MSCs后的PD大鼠直到90
d无一例意外死亡。这说明MSC和胚胎干细胞虽然均具有多向分化潜能, 在体内均能够长期存活, 但在体内微环境的作用下二者表现出不同的特性。这为我们更好地选择细胞替代治疗的种子细胞提供了理论依据。
免疫排斥是干细胞用于异体替代治疗的一个重要问题。本实验将人的MSCs注入大鼠脑内却未发生由于免疫排斥而引起的大鼠死亡, 而且MSCs能够在大鼠脑内较长时间存活, 这除了与脑本身免疫原性较弱有关外,
也与MSCs自身特性有关。最近有报道表明[19, 20], MSCs和ES细胞均表达组织相容性复合物Ⅰ而缺乏组织相容性复合物Ⅱ, 免疫原性较弱。同时, MSCs和ES细胞均能直接或间接抑制T细胞的功能。这为干细胞用于临床治疗增加了更多的可能性。
MSCs在大鼠脑内的命运由脑内微环境决定。脑内存在一些细胞因子和黏附分子与MSC的增殖、
分化与迁移有关。在大鼠脑内FGF-2 (fibroblast growth factor 2)是MSCs的丝裂原, 脑内高水平表达FGF-2能够促进MSCs增殖,
但在体外FGF-2却又能阻止MSCs的分化[17]。MSCs表达其受体的其它神经营养因子如NGF(nerve growth factor), 能够促使MSCs向神经细胞系分化[21]。MSCs迁移的发生是由于脑内黏附分子(如神经细胞黏附分子,
胚胎间充质细胞多表达)的上调所致[22]。
本实验观察发现, 人骨髓MSCs在大鼠脑内有向血管趋向性迁移的特点, 而且部分细胞出现于血管壁, 细胞形态近似于血管内皮。这可能与脑损伤后激发的组织修复有关。也有证据表明,
在脑内分裂的细胞经常出现在血管附近[23]。
总之, MSCs取材方便, 扩增迅速, 具有多向分化潜能, 病人可以为自身提供细胞治疗的种子细胞, 避免了免疫排斥和移植物抗宿主病的发生, 是理想的治疗神经系统疾病以及其它损伤性、 遗传缺陷性或退行性疾病的种子细胞。
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